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Elastin 弹性蛋白/胶原酶是应用非常广泛的消化剂

 发布时间:2022-11-23    点击量:95
  Elastin 弹性蛋白/胶原酶是广泛应用的消化剂,胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶中由于产品的活力和纯度不同,对细胞的消化能力也不同,胰蛋白酶对细胞的作用,取决于细胞类型、酶的活力、配制的浓度、消化的温度、无机盐离子、pH以及消化时间的长短等。
 
  是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害,该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培养液配制,即操作简便又可提高细胞成活率,浓度200u/mL或0,0,3mg/mL,此酶消化作用缓和,无需机械振荡,但胶原酶价格较高,大量使用将增加实验成本。
 
  Elastin 弹性蛋白/胶原酶的具体操作方法如下:
 
  ①在剪断连接婴儿端和母亲的脐带后,立刻用脐带夹夹住,防止内部污染。装入无菌袋(容器)中,送进实验室。
 
  ②在生物安全柜或超净工作台内,取出脐带,连同脐带夹用75%的酒精泡2min(50ml离心管或250px皿)。如果脐带较长,无法装入容器,可以把脐带剪成250px左右,但是剪断之前一定要用脐带夹加好,防止酒精进入脐带内部,损伤细胞。
 
  ③用酒精处理完,迅速移入装有PBS或生理盐水的容器中浸泡清洗2次,每次2min即可。
 
  ④剪掉脐带夹,把脐带剪成2-75px段,用剪刀从脐静脉内侧剖开脐带,用带齿镊子(脐带组织比较滑,用带齿镊子好操作)把脐静脉、脐动脉以及脐带包膜去除,防止杂细胞混入。
 
  ⑤用剪刀剪碎脐带组织,0,1%Ⅱ型胶原酶(稀释液用DMEM/F12)过夜消化,4℃过夜消化。
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