一、流式细胞术特点速度快:流式细胞术是一种快速的实验技术，通过对单个细胞或生物颗粒进行逐个检测，测量速度可达每秒数千甚至上万个细胞。灵敏度高:每个细胞只需带有1000~3000个荧光分子，流式细胞术就能够准确检测出来。这种高灵敏度的特性使得流式细胞术成为研究复杂生物系统和细胞内分子水平变化的重要工具。多参数:可应用于多参数分析，通过多色荧光染色同时对单个细胞或生物颗粒的多种特征进行细致分析。这种高度精密的方法使研究人员能够深入研究细胞的内部结构和功能，为疾病诊断和治疗提供重要...

分析型流式细胞仪检测原理将待测样品制成单细胞悬液，在鞘液的包裹下进入流式细胞仪内的检测区域，细胞在激光的照射下会发生散射和折射，产生的散射光信号和荧光信号由不同的通道接收。其中前向角散射光（FSC）的强度与细胞直径成正相关，可以理解为细胞直径越大，FSC越强，细胞直径越小，FSC越弱。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。侧向角散射光（SSC）的强度与细胞内颗粒结构复杂程度成正相关（与细胞中所含的细胞器、细胞核等的数量成正比），可以理...

一、流式细胞术流式细胞术（FlowCytometry，FCM）从字面意义理解，Flow—Fluid、Cyto—Cell、Metry—Measurement，是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒（如微球，细菌，小型模式生物等）逐个进行快速定量分析和分选的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开，以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体...

01出现严重的RNA污染如图所示，质粒提取之后进行琼脂糖凝胶电泳，出现明显的RNA条带，说明有RNA污染。原因及解决方法：（1）未在缓冲液RS*中事先加入RNaseA。解决方法：补加RNaseA。（2）加入RNaseA的缓冲液RS*长期保存于室温，导致RNaseA活性下降。解决方法：每次使用后置于4℃保存。若长期不用，置于-20℃保存。（3）细菌过量,RNaseA不能有效降解RNA。解决方法：将细菌用量减半或增加RNaseA在缓冲液RS*中的浓度。02出现基因组污染（1）菌体...

一、质粒质粒是一种环状的小分子DNA，是进行DNA重组的常用载体，在分子生物学研究和基因治疗中对于质粒的产量和质量都有一定的要求，其中超螺旋比例和内毒素含量是影响质粒质量的两个重要因素。虽然超螺旋通常是主要形式，但在所有质粒制备中，切口和线性DNA形式通常作为次要形式回收。但是，如果操作不当的话，超螺旋形式的DNA质粒的收获率可能不高，那么如何提高质粒DNA的超螺旋比例呢？二、提高质粒超螺旋比例的方法（1）在生长平台期收获细菌培养物在对数生长过程中过早收获细菌时，经常会看到带...