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  • 2023
    如何选择蛋白表达系统?
    如何选择蛋白表达系统?

    在蛋白表达系统的相关研究中,从头合成蛋白质并不是一个可行的选择。因此需要借助活细胞或细胞器用作生产和构建蛋白质的工厂。那么你知道该如何选择蛋白表达系统吗?让我们一起来看看吧!目前,较为主流的表达宿主有大肠杆菌(E.coli)、毕赤酵母(P.pastoris)、昆虫-杆状病毒(Bac-to-Bac系统)以及哺乳动物细胞系(CHO、HEK29...

  • 2023
    细胞转染过程中需要注意什么?

    随着基因和蛋白功能的深入研究,转染已经成为科研实验中最chang用的技术手段之一。那么在细胞转染过程中需要注意什么呢?让我们一起来看看吧!一、转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最shi合实验设计的转染试剂。不同转染试剂有不同的转染方法,但大多大同小异。转染时应跟据具体转染试剂推荐的方法,但也要注意,因不同实...

  • 2023
    细胞转染是如何分类的?

    细胞转染是指将外源性基因导入到细胞内的技术。那你知道细胞转染是如何分类的吗?让我们一起来看看吧!一、根据导入时间长短进行分类根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短,可以分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染(transienttransfection):指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内,该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。细胞中瞬时转染的外源基因表达时间有限,通常仅持续几天,直到外源基因在细胞分裂过程中因各种因素丢失为止。多用于启动子和其他调控元件的分析。...

  • 2023
    PCR管是进行PCR反应实验的重要器材

    PCR管是PCR反应的重要实验器材,关乎反应体系的整体功效。它主要有以下几个特点:1.需要具备高热稳定性。PCR反应过程中,3步中的第一步变性需要高温,传统PCR管都是由坚硬的塑料材料制成,能够承受高温的影响,不会变形或烧融。现在还有一种新型PCR管,叫做光学透明PCR管,也具备了一定的热稳定性。2.内表面需要具备良好的附着性。这是因为PCR反应的三个步骤需要发生在管内,每个步骤对于成功的PCR反应都是至关重要的。PCR管内表面需要特殊处理,表面要光滑而均匀,以保持杂质相对较...

  • 2023
    细胞扩增技术与策略有什么?

    细胞扩增技术与策略是实现细胞大规模增殖的关键步骤,可以根据细胞类型、扩增需求和实际情况选择不同的技术和策略。那么你知道细胞扩增技术与策略有什么吗?让我们一起来看看吧!一、传代培养:1.间歇性传代:将细胞从培养器具(如细胞瓶或培养皿)中解离并移植到新的培养器具中,以分离细胞,控制细胞密度和细胞增殖速率。2.连续传代:利用旋转式培养器具(如旋转壶、旋转筒)或生物反应器等,实现细胞的持续增殖。连续传代可以减少人工处理和移植对细胞的伤害,提高细胞扩增效率。二、悬浮培养:1.搅拌培养:...

  • 2023
    PCR管的维护保养方法

    聚合酶链式反应(PCR)是基因工程中常用的一种分子生物学技术,PCR管通过模拟体内DNA复制过程快速合成特定DNA片段。其原理基于DNA的复制过程,包括三个步骤:变性、退火和延伸。变性(Denaturation)阶段,反应体系中的DNA双链结构在高温(通常为94°C-98°C)下被分离成两条单链DNA。这一步是通过加热使两条DNA链断裂,目的是将DNA的双链结构变为单链结构以提供模板。退火(Annealing)阶段,温度被降低至50°C-65°...

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