英诺思EasyIso™ 人类CD8 T细胞分离试剂盒操作步骤

引言
CD8 T细胞在免疫应答中扮演核心角色，其分离纯度直接影响下游实验的可靠性。然而，传统分离方法常面临操作复杂、细胞活性受损等问题。英诺思推出的EasyIso™ 人类CD8 T细胞分离试剂盒（货号SN3103），通过创新的无柱磁极分离技术，实现高纯度、快速且温和的CD8 T细胞分选，为科研与临床研究提供高效工具。上期介绍了原理《英诺思EasyIso™ 人类CD8 T细胞分离试剂盒（SN3103）实验原理》，这期介绍一下操作步骤。

一、操作步骤：快速四步法

1. 样本制备：将PBMC单细胞悬液浓度调整至1×10⁸ cells/mL；

2. 抗体孵育：按100 μL/mL加入EasyIso™ Human CD8 T Cell Isolation Cocktail，常温孵育10分钟

3. 磁珠结合：加入链霉亲和素纳米磁珠（100 μL/mL），轻柔混匀后孵育5分钟；

4. 磁极分离：

使用磁力架吸附3-5分钟（单孔/联排架）；

倾斜磁力架，将富含CD8 T细胞的上清转移至新管中，即可获得高纯度细胞。

全程仅需20分钟，显著提升实验效率。

二、关键试剂与设备要求

缓冲液：推荐使用FACS Buffer（1×PBS + 0.02% EDTA + 2% FBS），提高细胞得率；

耗材：70 μm无菌滤网、无菌离心管；

仪器：离心机、磁力架（兼容单孔或联排管）。

三、使用建议与注意事项

PBMC制备：推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心，避免红细胞裂解法；

无菌操作：全程需在超净台中进行，防止污染；

渗透压稳定：确保FACS Buffer配制准确，保护敏感免疫细胞；

磁珠处理：使用前充分震荡混匀磁珠30秒，确保结合效率。

四、数据验证：纯度高达91.2%

实验数据显示，使用SN3103试剂盒分选后：

分选前：PBMC中CD8+ T细胞占比14.3%；

分选后：CD3+CD8+ T细胞纯度提升至91.2%（图B），满足高标准实验需求。

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