RPMI-1640培养基全攻略：原理、配方、应用与操作指南 | 专业解析

一、什么是RPMI-1640培养基？它的发展历史是什么？

RPMI-1640培养基是细胞生物学和医学研究中最基础、应用zui广泛的培养基之一。它的名称RPMI 源自 Roswell Park Memorial Institute（罗斯维尔公园纪念研究所），1640 则是该研究所配方的编号。

它于1966年被开发出来，最初是为了培养人类白血病细胞（悬浮细胞）而设计。由于其优异的配方，它迅速被发现适用于多种类型的细胞培养，特别是淋巴细胞、肿瘤细胞和其他悬浮细胞，成为了免疫学和癌症研究领域的黄金标准。

二、RPMI-1640培养基的独特配方与核心成分解析

RPMI-1640的配方经过精心优化，使其特别适合悬浮细胞的生长。其核心特点包括：

   丰富的维生素和氨基酸：含有非常全面的维生素（如生物素、维生素B12）和氨基酸 profile，为快速增殖的细胞（如癌细胞、免疫细胞）提供充足的营养基础。

   高浓度的谷氨酰胺：谷氨酰胺是细胞能量代谢的关键氨基酸，对细胞增殖至关重要。1640中含有相对较高浓度的谷氨酰胺。但需注意，谷氨酰胺在溶液中不稳定，会自行降解，因此对于长期培养，常需额外补加。

   还原剂谷胱甘肽：配方中包含还原型谷胱甘肽，这有助于维持细胞的氧化还原状态，减少压力，特别有利于敏感细胞的生长。

   缓冲体系：通常使用碳酸氢钠（NaHCO₃）作为缓冲剂，需要在5% CO₂ 的培养箱环境中使用，以维持生理性的pH值（约7.2-7.4）。

三、RPMI-1640培养基的常见应用场景

1.  免疫学研究：是培养T细胞、B细胞、NK细胞等外周血单核细胞（PBMCs）的shou选培养基，用于免疫应答、抗体生产和细胞治疗（如CAR-T）研究。

2.  癌症研究：广泛应用于多种白血病细胞系（如HL-60, K562）和悬浮肿瘤细胞的培养，用于药物筛选、机制研究和毒性测试。

3.  杂交瘤技术：用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞通常在RPMI-1640中生长良好。

4.  特殊贴壁细胞：某些贴壁细胞，如人脐静脉内皮细胞（HUVECs），也常用1640培养基进行培养。

四、如何使用与操作指南？

1.  复苏与融化：将冷冻的培养基从-20℃或更低温度取出，置于4℃冰箱过夜解冻或37℃水浴中轻轻摇晃至wanquan融化。避免反复冻融。

2.  补充添加剂：

       血清：通常需添加10% FBS（胎牛血清）或其它类型的血清。

       抗生素：常加入1%的青霉素-链霉素（Penicillin-Streptomycin, P/S） 以防止细菌污染。

       谷氨酰胺：如果使用基础培养基，需补加2mM L-谷氨酰胺（或使用更稳定的二肽形式GlutaMAX™）。

3.  储存：配制wanquan后的培养基应置于4℃避光保存，并在2-4周内使用完毕，以避免营养成分（尤其是谷氨酰胺和维生素）降解。

五、常见问题（FAQ）与解决方案

   Q1: 我的细胞在1640里长得慢，怎么办？

       A：检查血清批次和质量，确保添加了足量血清；确认是否补加了谷氨酰胺；排查是否存在支原体污染。

   Q2: 培养基颜色变紫或变黄是什么原因？

       A：变黄通常意味着代谢产酸，pH值下降，说明细胞密度过高或需要换液。变紫则意味着pH值升高，通常发生在培养基暴露在空气中过久，CO₂溢出所致。正常颜色应为透明的红色或橙红色。

   Q3: 哪里可以买到质量好的1640培养基？

       A：国际品牌如Gibco (Thermo Fisher)、HyClone (Cytiva) ，质量稳定可靠。国内品牌如碧云天（Beyotime）、翌圣生物（Yeasen） 等也提供了高性价比的选择。

结论：

RPMI-1640培养基因其独特的配方，在免疫细胞和悬浮肿瘤细胞的培养中扮演着不可替代的角色。正确理解其特性、掌握与DMEM等培养基的区别，并根据自身实验需求选择合适的培养基和正确的操作方法，是细胞实验成功的关键第一步。

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