一、Moltox菌株的核心特点与原理
这些菌株经过精心设计,具有以下共同特征,使其能够灵敏地检测出遗传毒性物质:
1. 组氨酸营养缺陷型(His⁻):
这是Ames试验的基础。这些菌株自身不能合成组氨酸(一种必需氨基酸),因此在没有组氨酸的培养基上无法生长形成菌落。
回复突变:如果受试化合物能引起DNA突变,使菌株恢复合成组氨酸的能力(His⁻ → His⁺),这些回复突变菌就能在无组氨酸的培养基上生长形成可见的菌落。菌落数目的多少与化合物的致突变性强弱成正比。
2. 细胞壁通透性增强(rfa突变):
菌株携带`rfa`突变,导致其细胞壁外层的脂多糖(LPS)屏障不完整,使得大分子化合物(如苯并芘等多环芳烃)更容易进入细胞内部,提高了检测灵敏度。
3. DNA修复系统缺陷(ΔuvrB):
菌株缺失了`uvrB`基因,导致其切除修复系统功能丧失。这使得DNA损伤难以被正确修复,突变更容易被固定和积累,进一步增强了检测的敏感性。
4. 携带R因子质粒(pKM101):
许多Moltox菌株(如TA98, TA100)体内含有一个名为pKM101的质粒。
该质粒能增强细胞的SOS应急修复反应(一种容易出错的修复方式),从而提高对许多致突变剂的敏感性。
二、常见的Moltox菌株及其特性
以下是一些常用、具代表性的Moltox菌株:

三、Moltox菌株如何使用:
Ames试验流程简述
1. 准备菌株:复苏并培养Moltox菌株。
2. 制备受试物:将待测化合物溶解在适当的溶剂中。
3. 混合与诱导:将菌液、受试物以及S9代谢活化系统(模拟哺乳动物肝脏代谢功能,用于检测前致癌物)在顶层琼脂中混合。
4. 铺板:将混合物倒入葡萄糖琼脂平板(无组氨酸)上。
5. 培养:在37°C下培养48-72小时。
6. 计数:计数每板上回变菌落的数量。
7. 结果判定:如果 test substance 组的回变菌落数是阴性对照组的两倍或以上,并具有剂量-反应关系,则判定为阳性结果(具有致突变性)。
—— 总结
Moltox菌株是Ames试验的标准化、商业化工具。
它们通过多重遗传修饰(组氨酸缺陷、细胞壁通透性增加、DNA修复缺陷、携带R因子)来检测遗传毒性的敏感性。
不同菌株检测不同类别的突变(移码突变 vs. 碱基置换),因此在实践中通常需要一组菌株(如TA98, TA100, TA1535, TA97, TA102)来全面评估化合物的致突变潜力。
这些菌株为全球的遗传毒理学研究和风险评估提供了至关重要、不可替代的工具。
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