血清的保存与分装

　　关于血清的保存条件，这是一个非常重要且常见的问题。正确的保存是保证血清质量和细胞培养实验成功的关键。
 

　　以下是血清保存条件的详细说明，主要针对最常见的胎牛血清，其他类型血清(如小牛血清、马血清等)也适用类似原则。
 

　　一、血清保存的核心原则：避免反复冻融
 

　　反复冻融是损害血清质量的最主要因素。它会导致：
 

　　蛋白质变性、沉淀。
 

　　营养成分降解。
 

　　生长因子活性丧失。
 

　　增加沉淀物的形成。
 

　　二、血清的建议存储温度与解冻
 

　　1.储存：建议将血清储存在-15℃~-20℃。
 

　　Ps:已开封血清的保存
 

　　最佳实践：分装！分装！分装！
 

　　这是保护血清活性最有效的方法。收到血清后，在首次解冻后立即进行无菌分装。
 

　　分装体积：根据您每次实验的常用量(如 50mL/管)，确保每管能在短时间内用完。
 

　　储存：将分装好的血清立即放回-20°C或-80°C冷冻。使用时取出一管，其余血清仍处于未解冻状态。
 

　　2. 解冻：不建议于4℃过夜解冻，也不建议直接将冷冻的血清放在37℃水浴或者温箱中解冻，因为若血清没有混匀，底部的蛋白会变性形成沉淀。
 

　　血清解冻的方法(三步法)
 

　　三、 可能出现的问题：血清沉淀物
 

　　血清在储存和解冻过程中出现沉淀是常见现象，主要有：
 

　　脂蛋白聚合物：显微镜下可见的小黑点，通常不影响细胞生长。
 

　　磷酸钙结晶：外观像白色碎片或絮状物，可能影响细胞生长。
 

　　纤维蛋白：肉眼可见的絮状沉淀。
 

　　如果沉淀量不多，无需特别处理。如果量多，建议过滤后使用。
 

　　四、总结：最佳操作流程
 

　　收货检查：收到血清后，检查包装是否完好，立即根据计划储存于-20°C。
 

　　首次处理：使用时，从冰箱取出，置于4°C 过夜解冻。
 

　　立即分装：解冻后，在超净工作台中进行无菌分装至多个小体积无菌离心管中。

 

　　冷冻储存：将分装管立即放回-20°C冷冻。
 

　　日常使用：每次实验取出一管分装血清，在4°C解冻或室温水浴快速解冻后使用。已解冻的血清如在1个月内不能用完，建议丢弃或重新过滤后4°C短期保存。
 

　　遵循以上保存条件，可以最大限度地维持血清的生物学活性，确保您的细胞培养实验结果稳定可靠。