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更新时间:2025-12-08
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一、GoldBio荧光素钾盐核心概述
GoldBio的荧光素钾盐,是萤光素酶的天然底物。在ATP和氧气的存在下,萤光素酶会催化荧光素发生氧化反应,产生生物发光信号(发出波长为560nm左右的黄绿色光)。
二、GoldBio荧光素钾盐如何使用(标准流程简述)
通常需要将其配制成工作液。一个常见的体外检测配方如下:
1. 配制储存液(如100mM):
称取适量荧光素钾盐粉末,溶于pH 7.8左右的缓冲液(如 Tris、HEPES)或无菌水中。
过滤除菌,分装避光保存于-20°C或-80°C。
2. 配制工作液(1X):
使用前,将储存液用检测缓冲液稀释至所需浓度(通常为0.1-1mM)。
工作液中通常还需加入辅酶A,以稳定发光信号,获得持续的“辉光型”发光而非一闪而过的“闪光型”。
3. 检测:
对于细胞:弃去培养液,加入工作液,裂解细胞并混匀后,立即用酶标仪(化学发光模块)或发光计检测。
对于动物:腹腔注射一定剂量(如150mg/kg)的荧光素钾盐(溶于PBS),等待约10-15分钟让其在体内分布均匀后,进行成像。
三、GoldBio荧光素钾盐优势与注意事项
优势:
性价比高:相比许多品牌的预混检测试剂盒,自行购买粉末配制成本更低,尤其适合大批量实验。
灵活性高:可根据实验需求自行优化工作液的配方(如缓冲液pH、离子强度、添加辅酶A等)。
水溶性好:钾盐形式解决了溶解难题。
四、GoldBio荧光素钾盐注意事项
1. 避光保存:荧光素对光敏感,粉末和溶液均应避光保存,以防降解。
2. 无菌操作:用于体内注射时,溶液必须经过无菌过滤(0.22μm滤膜),并确保无热原。
3. pH敏感性:萤光素酶反应的最适pH约为7.8,缓冲液pH至关重要。
4. 体内注射浓度:需根据动物模型和成像系统优化注射剂量和成像时间。
五、总结与选购建议
GoldBio的荧光素钾盐是一款可靠、经济的基础性发光底物。
如果您需要:自行建立或大量进行萤光素酶报告基因实验、ATP检测,或为活体成像配制注射剂,那么购买GoldBio的荧光素钾盐粉末自行配制,是具成本效益的选择。
如果您需要:进行少量、便捷的常规报告基因检测,且对操作便捷性要求高,那么直接购买预混好的“辉光型”萤光素酶检测试剂盒(如Promega, Beyotime等)可能更节省时间和保证结果稳定性。
简单来说,GoldBio荧光素钾盐是“原材料”,适合动手配制和优化体系的用户;而试剂盒是“即食餐”,适合追求标准化和快速流程的用户。
GoldBio,Promega, Beyotime代理——天津益元利康生物科技有限公司,欢迎咨询选购。
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