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荧光素钾盐使用说明

更新时间:2025-12-08点击次数:57
 GoldBio的荧光素钾盐是一种在生物发光和荧光成像实验中非常常用的核心底物。

一、GoldBio荧光素钾盐核心概述

GoldBio的荧光素钾盐,是萤光素酶的天然底物。在ATP和氧气的存在下,萤光素酶会催化荧光素发生氧化反应,产生生物发光信号(发出波长为560nm左右的黄绿色光)。

 

二、GoldBio荧光素钾盐如何使用(标准流程简述)

通常需要将其配制成工作液。一个常见的体外检测配方如下:

1.  配制储存液(如100mM):

       称取适量荧光素钾盐粉末,溶于pH 7.8左右的缓冲液(如 TrisHEPES)或无菌水中。

       过滤除菌,分装避光保存于-20°C-80°C

2.  配制工作液(1X):

       使用前,将储存液用检测缓冲液稀释至所需浓度(通常为0.1-1mM)。

       工作液中通常还需加入辅酶A,以稳定发光信号,获得持续的辉光型发光而非一闪而过的闪光型

3.  检测:

       对于细胞:弃去培养液,加入工作液,裂解细胞并混匀后,立即用酶标仪(化学发光模块)或发光计检测。

       对于动物:腹腔注射一定剂量(如150mg/kg)的荧光素钾盐(溶于PBS),等待约10-15分钟让其在体内分布均匀后,进行成像。

三、GoldBio荧光素钾盐优势与注意事项

优势:

   性价比高:相比许多品牌的预混检测试剂盒,自行购买粉末配制成本更低,尤其适合大批量实验。

   灵活性高:可根据实验需求自行优化工作液的配方(如缓冲液pH、离子强度、添加辅酶A等)。

   水溶性好:钾盐形式解决了溶解难题。

 

四、GoldBio荧光素钾盐注意事项

1.  避光保存:荧光素对光敏感,粉末和溶液均应避光保存,以防降解。

2.  无菌操作:用于体内注射时,溶液必须经过无菌过滤(0.22μm滤膜),并确保无热原。

3.  pH敏感性:萤光素酶反应的最适pH约为7.8,缓冲液pH至关重要。

4.  体内注射浓度:需根据动物模型和成像系统优化注射剂量和成像时间。

五、总结与选购建议

GoldBio的荧光素钾盐是一款可靠、经济的基础性发光底物。

   如果您需要:自行建立或大量进行萤光素酶报告基因实验、ATP检测,或为活体成像配制注射剂,那么购买GoldBio的荧光素钾盐粉末自行配制,是具成本效益的选择。

   如果您需要:进行少量、便捷的常规报告基因检测,且对操作便捷性要求高,那么直接购买预混好的辉光型萤光素酶检测试剂盒(如PromegaBeyotime等)可能更节省时间和保证结果稳定性。

简单来说,GoldBio荧光素钾盐是原材料,适合动手配制和优化体系的用户;而试剂盒是即食餐,适合追求标准化和快速流程的用户。

GoldBioPromegaBeyotime代理——天津益元利康生物科技有限公司,欢迎咨询选购。

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