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Wako质谱级赖氨酰肽链内切酶概述

更新时间:2026-03-04点击次数:36

Wako质谱级赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase®, MS Grade,货号 125-05061)是蛋白质组学研究中用于质谱样品前处理的一款核心工具酶。它的特点是特异性高、性能稳定,特别适合与胰蛋白酶联用以提升蛋白鉴定覆盖率

一、 Wako的质谱级赖氨酰肽链内切酶核心信息一览

项目

说明

产品名称

质谱级赖氨酰肽链内切酶 (Lysyl Endopeptidase®, MS Grade)

品牌/货号

FUJIFILM Wako / 125-05061 

核心特性

高特异性(仅切割赖氨酸C端)、高稳定性(耐受尿素及SDS)、低漏切率 

产品规格

20 μg × 5  (冻干粉,含Tris-HCl缓冲盐

应用场景

蛋白质谱鉴定、蛋白测序、肽段图谱分析、与胰蛋白酶联合酶切 

二、Wako的质谱级赖氨酰肽链内切酶产品特性与应用优势

这款酶之所以在质谱分析中表现出色,主要源于以下几个关键技术优势:

1. ji致的切割特异性:它特异性水解赖氨酸(Lys)残基C末端的肽键。与同时切割赖氨酸和精氨酸的胰蛋白酶相比,它的酶切产物通常是更长的肽段,这在某些蛋白测序中具有独特-价值

2. 与胰蛋白酶联用,实现金标准"酶切方案:这是它最核心的应用场景。先使用Lys-C在含尿素的变性条件下进行第1步切割,稀释后再用胰蛋白酶进行第二步切割。这种组合策略能显著提高酶解效率,尤其是对膜蛋白等难溶蛋白,可大幅提升肽段鉴定数量和序列覆盖率

 3. 出色的稳定性与兼容性:该酶活性不受4M尿素或0.1% SDS等常见变性剂的影响,这意味着它可以适应复杂的样品处理条件。在pH 5.0-12.0范围内稳定,zui适反应pH 9.0-9.5

4. 显著提升质谱数据质量:实验数据表明,与单独使用胰蛋白酶相比,Lys-C与胰蛋白酶联用可以将漏切位点比例从8%降至3%,同时鉴定出的多肽数量从17个增加到22个,有效提高蛋白测序的覆盖度

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三、Wako的质谱级赖氨酰肽链内切酶使用要点

溶解:使用前,将一支(20 µg)冻干粉溶解于 1 mL 2 mmol/L Tris-HCl 缓冲液 (pH 8) 中,轻轻混匀即可

储存:必须在 -20°C 条件下,避光保存,以保持其活性稳定

参考用法(胶内酶切):凝胶片段经脱色、还原烷基化、脱水干燥后,用含Lys-C的缓冲液(如50 mmol/L Tris-HCl, pH 8.5)在冰上充分溶胀,随后在 37°C 下酶切过夜,最后抽提肽段进行质谱分析

四、Wako的质谱级赖氨酰肽链内切酶注意事项

该产品仅用于研究目的,不可用于人体或临床诊断

其来源菌株水解无色杆菌根据新的分类学被鉴定为产酶溶杆菌,这并不影响产品性能

使用时需注意其抑制剂,如DFPPMSFTLCK等,避免在溶液中加入这些物质

你是计划用它来做胶内酶切还是溶液内酶切?不同的实验流程在步骤上会有些差异,可以告诉我你的具体应用,技术人员可以帮你整理更详细的操作步骤。

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