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Zymo 质粒中提/大提试剂盒该如何使用?

 发布时间:2022-09-01    点击量:76
  Zymo 质粒中提/大提试剂盒采用硅胶模吸附技术,专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的溶液P4和过滤器CS1,可有效的出去内毒素、蛋白质杂志;整个提取过程仅需1h,方便快捷。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和细胞转染多种细胞等试验。推荐每次菌液使用量:高拷贝质粒推荐使用量为100ml,得率一般在500-1500ug左右;低拷贝质粒推荐使用量为200ml,得率一般在200-600ug左右。
 
  Zymo 质粒中提/大提试剂盒注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
 
  1.溶液P1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
 
  2.使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液PW中加入无水乙醇。
 
  3.使用前先检查平衡液BL,溶液P2和P4是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
 
  4.注意不要直接接触溶液P2和P4,使用后应立即盖紧盖子。
 
  5.使用过滤器时请将推柄小心缓慢地从过滤管中抽出,避免滤膜因压力而松动。
 
  6.提取的质粒量与细菌培养浓度,质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P4的用量;洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热,可以适当延长吸附和洗脱时间,以提高提取效率。
 
  7.实验前使用平衡液BL处理吸附柱,可以激活硅基质膜,提高得率。
 
  8.用平衡液处理过的柱子建议立即使用,放置时间过长会影响使用效果。
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