Zymo 质粒中提/大提试剂盒该如何使用？

　　Zymo 质粒中提/大提试剂盒采用硅胶模吸附技术，专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的溶液P4和过滤器CS1，可有效的出去内毒素、蛋白质杂志；整个提取过程仅需1h，方便快捷。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化和细胞转染多种细胞等试验。推荐每次菌液使用量：高拷贝质粒推荐使用量为100ml，得率一般在500-1500ug左右；低拷贝质粒推荐使用量为200ml，得率一般在200-600ug左右。
 

　　Zymo 质粒中提/大提试剂盒注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
 

　　1.溶液P1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。
 

　　2.使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液PW中加入无水乙醇。
 

　　3.使用前先检查平衡液BL，溶液P2和P4是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
 

　　4.注意不要直接接触溶液P2和P4，使用后应立即盖紧盖子。
 

　　5.使用过滤器时请将推柄小心缓慢地从过滤管中抽出，避免滤膜因压力而松动。
 

　　6.提取的质粒量与细菌培养浓度，质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、P4的用量；洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热，可以适当延长吸附和洗脱时间，以提高提取效率。
 

　　7.实验前使用平衡液BL处理吸附柱，可以激活硅基质膜，提高得率。
 

　　8.用平衡液处理过的柱子建议立即使用，放置时间过长会影响使用效果。