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Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒的五种使用方法

 发布时间:2022-11-02    点击量:50
  Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒提供了一种简单、可靠、快速的方法可以从细胞和容易研磨的动物组织中提取高质量的RNA,为一些提取困难的标本(例如脂肪组织)提供了很好的解决方案。纯化的RNA可以随时使用,非常适合对低量DNA污染敏感的下游应用,如实时荧光定量PCR。不需要通过氯仿分层,只需五步即可从各种组织中快速提取高质量的RNA,安全无毒,环保健康。
 
  Ezb DNA/RNA/组织提取试剂盒的五种使用方法:
 
  一.CTAB法
 
  CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法,CTAB是一种阳离子去污剂,它能与核酸形成复合物,这些复合物在低盐溶液中会因溶解度的降低而沉淀,而在高盐溶液中可解离,从而使DNA和多糖分开,再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在该法中使用的聚维酮(PVP)与多酚结合形成复合物,从而可有效避免多酚类化合物影响DNA降解。
 
  二.SDS法
 
  相比于CTAB,SDS法更加方便简单。近年来科研者们提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解细胞使其释放出DNA的方法,后续的DNA纯化过程中通常采用酚/氯仿处理,但对于植物DNA纯化不是一个很好的选择,因为酚的使用可降低DNA的提取效率和纯度。实验证明,若采用较大的离心力和较长的离心时间,然后用氯仿一异戊醇代替酚来去除变性蛋白质,可以克服由于酚的掺入及残留对以后酶切带来的困难。
 
  三.氯化节法
 
  氯化节法的提取获得率较高。原因可能为氯化节不仅与植物细胞壁上的多糖经基反应生成醚,而且与细胞液中多糖物质反应破坏糖链,有利于DNA的释放和提纯。
 
  四.高盐低pH法
 
  高盐低pH法是指以无机盐和异丙烯为提纯试剂提取DNA的方法。通常采用的无机盐为低pH的醋酸钾,用来沉淀蛋白质。该方法方便省时,所需样品量少。
 
  五.果胶酶法
 
  利用果胶酶对植物破碎细胞进行抽提的一种技术。
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