百奥益康试剂盒使用指南(通用流程)

更新时间：2025-08-11

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　　以下是百奥益康通用型试剂盒的标准操作流程及关键注意事项(以细胞培养类试剂为例，适用于多数产品线)

　　一、百奥益康试剂盒操作前准备

　　1. 试剂复温/解冻

　　- 细胞培养基、血清等置于 2-8℃缓慢解冻(24小时) 或 37℃水浴快速解冻(≤15分钟)，解冻后立即使用。

　　- 冻干粉试剂(如细胞因子)用指定缓冲液复溶，轻柔涡旋，避免泡沫。

　　2. 设备预冷/消毒

　　- 超净台紫外灭菌30分钟，移液器、离心管等表面酒精擦拭。

　　- 磁珠分选类试剂需提前将分离架置于4℃预冷。

　　二、百奥益康试剂盒核心操作流程

　　> 以"细胞刺激/培养试剂盒"为例

　　1. 样本处理

　　- 分离PBMC或靶细胞，用预冷PBS洗涤2次(300g, 5分钟)，重悬于百奥益康专用基础培养基。

　　2. 试剂配制

　　- 按说明书比例配制工作液(例：刺激因子母液+培养基稀释)，现配现用。

　　- 关键点：含蛋白组分避免反复冻融；促生长因子需避光。

　　3. 细胞刺激/培养

　　- 将细胞悬液加入预铺工作液的培养板(密度：5×10⁵/mL)，轻摇混匀。

　　- 培养条件：37℃, 5% CO₂, 95%湿度，定期观察形态。

　　4. 结果检测

　　- 收集细胞：72小时后离心(300g, 10分钟)，取上清测因子分泌(ELISA)或细胞裂解液测通路蛋白(WB)。

　　三、百奥益康试剂盒磁珠分选类试剂盒特殊步骤（如免疫细胞分选）

　　1. 抗体标记

　　- 每10⁷细胞加 10μL抗体混合液，4℃避光孵育 10分钟。

　　2. 磁珠结合

　　- 加 5μL磁珠/10⁷细胞，混匀后4℃孵育 15分钟。

　　3. 磁性分离

　　- 置分离柱于磁场中，上样后收集流穿液(目标细胞)，用缓冲液冲洗3次。

　　四、百奥益康试剂盒关键注意事项

　　五、百奥益康试剂盒故障排查速查表

　　- 细胞活性低 → 检测试剂pH(标准7.2-7.4)及内毒素(<0.1EU/mL)

　　- 分选纯度不足 → 确认抗体用量及孵育温度(严格4℃)

　　- 试剂沉淀 → 37℃温浴5分钟并涡旋(某些生长因子需过滤除菌)

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