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细菌活化的操作流程

 更新时间:2024-07-10    点击量:172
  活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。那么你知道细菌活化的操作流程是什么吗?让我们一起来看看吧!
 
  1. 在无菌操作下,用无菌微量吸管,从已溶解的管中吸取50μL(或1-2滴)的菌液,滴入固态培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近,以划线法接种于培养基。
 
  2. 将接种好的培养基置于温度的培养箱中培养。
 
  3. 在无菌环境下,以沾有75%酒精的棉花擦拭外管,在火焰上加热外管之尖端。滴数滴无菌水于加热处,使外管破裂,再以硬棒敲破尖端。取出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
 
  4. (a)适用于细菌用无菌吸管,吸取0.3-0.5mL之液体培养基,滴入内管内,并轻微震荡(可用该吸管协助),直到均匀悬浮。
 
  (b)适用于霉菌、酵母菌用无菌吸管,吸取0.3-0.5mL无菌水,滴入内管内,待干燥粉末溶解后,以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内,轻微震荡使其均匀后,静置30至60分钟。
 
  5. 取0.1-0.2mL之菌体悬浮液于平板培养基上,做划线分离培养或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒均匀涂抹,以检验菌种之纯度及活化情形,而剩余的菌体则全部移入液体培养基内,并依温度培养之。
 
  6. 某些菌种经过冷冻干燥保存后,迟滞期(lagperiod)较长,必须等培养二倍时间后才能长出,且再经过一、二次继代培养(Subculture)后才能正常生长。经过以上的努力后仍培养失败,才视为不能活化。
 
  7. 未开封之冷冻干燥管,请冷藏于4℃冰箱,切勿冷冻保存。
 
  更多有关细菌活化的操作流程,请联系天津益元利康生物科技有限公司!

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