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022-66387942在核酸分析实验中,缓冲液的选择直接影响电泳分辨率、条带质量及下游操作兼容性。TAE(Tris-乙酸盐-EDTA)与TBE(Tris-硼酸盐-EDTA)作为两种核心缓冲体系,其理化性质的差异导致显著不同的应用场景。
一、关键性能对比
1. 分辨率与片段适用性
缓冲液 | 最佳分离范围 | 迁移特性 | 局限性 |
TAE | >1 kb DNA | 迁移速率快,条带锐利 | 小片段(<500 bp)易扩散 |
TBE | <1 kb DNA/RNA | 高分辨率,条带紧密 | >5 kb DNA条带压缩模糊 |
2. 缓冲能力与稳定性
- TAE:
- 缓冲能力弱(乙酸盐pKa=4.76)
- 长时间电泳(>4 h)时阴极区酸化(pH↓),导致DNA迁移率下降、条带扭曲
- TBE:
- 强缓冲体系(硼酸盐pKa=9.24)
- 耐受高电压(>10 V/cm)及过夜电泳,pH波动<±0.2
二、下游应用兼容性
操作类型 | TAE适配性 | TBE适配性 |
胶回收DNA | ✅ 直接用于酶反应 | ❌ 需纯化去除硼酸盐 |
限制性酶切 | ✅ 无抑制 | ❌ 硼酸盐螯合Mg²⁺抑制酶活 |
连接/PCR | ✅ 兼容 | ❌ 需乙醇沉淀预处理 |
RNA电泳 | ❌ 乙酸促进降解 | ✅ 首先选择(稳定结构) |
三、特殊场景选型指南
实验需求 | 推荐缓冲液 | 科学依据 |
质粒超螺旋DNA分析 | TAE | 避免硼酸盐干扰拓扑异构体迁移 |
PAGE(蛋白质/小核酸) | TBE | 高分辨率+抗高压特性(300-500 V) |
基因组大片段分离(>20 kb) | TAE | 低电导率减少DNA拉伸效应 |
Northern blot(RNA分析) | TBE | 甲醛变性胶中保持RNA完整性 |
> 注:聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)需采用TBE(浓度建议:5-10%胶用0.5×TBE,15%胶用1×TBE)
四、操作优化建议
- TAE补救策略:
- 每4 h循环缓冲液或添加阴极区缓冲池(维持pH>7.5)
- TBE纯化方案:
- 胶回收DNA经苯酚抽提或硅胶柱纯化(ce di去除硼酸盐)
中科百抗解决方案
为保障实验可重复性,中科百抗提供:
- 严格质控的TAE/TBE速溶颗粒:
- 内控标准:电导率波动<2%,DNase/RNase-Free认证
- 场景化产品线:
产品类型 | 适用场景 |
TAE-HR | 大片段DNA分析(>5 kb) |
TBE-RNase | RNA电泳及Northern blot |
TBE-PAGE | 聚丙烯酰胺凝胶高分率分离 |
> 技术支撑:批次间一致性验证(HPLC离子色谱法),满足高通量检测需求
总结:TAE与TBE的选择本质是 “分辨率-稳定性-下游兼容性"的平衡。明确实验目标(片段大小、检测精度、后续操作)可快速锁定zui you缓冲体系,为分子诊断与基因功能研究奠定技术基础。
五、产品推荐
TAE缓冲液速溶颗粒
No.BM28R01
TAE是一种简便、快速的核酸电泳缓冲液,广泛应用于DNA琼脂糖凝胶电泳。TAE为白色至类白色速溶颗粒。TAE速溶颗粒是指将日常实验工作中用到的TAE缓冲液(89 mM Tris,89 mM硼酸,2 mM EDTA)以速溶颗粒的形式呈现。TAE速溶颗粒使用简单、快速,无需计算、称量、调节pH等繁琐的配液过程,即取即用;此外,TAE速溶颗粒的标准化大规模生产工艺可避免人为配液过程中的误差,保证缓冲液的批内及批间稳定性。
规格: 5*1L/50*1L
价格: 询价
保存温度:常温
效期:自生产之日起36个月
运输条件:常温