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022-66387942本试剂盒采用阴选的方式,通过无柱磁极分离人PBMC中的NK细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触NK细胞,能够最大限度保持NK细胞最原始的状态。
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非NK细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
优势:
–操作简便
–纯度可达85-93%
–35分钟左右完成分离
二、性能实测数据(对标美天旎)
> 数据来源:中检院细胞制品测评报告(2024-BETC-SN01)
三、操作极简
1.准备PBMC单细胞悬液至指定浓度,1 x 10^8 cells/mL
2.加入EasyIso™ Human NK Cell Isolation Cocktail至样品中,100 μL/mL
3.抗体和细胞孵育,4℃孵育15 min,
4.加入10倍体积的FACS buffer,400 g离心5分钟后,再采用初始体积的FACS重悬。
5.震荡混匀 Streptavidin Nanobeads,混匀30 s
6.加Streptavidin Nanobeads至样品中,100 μL/mL
7.轻柔混匀磁珠和细胞,孵育,在4℃孵育15 min
8.加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀。
总体积加入至2.5 mL (5 mL流式管)
总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管)
9.样品置于磁力架上,使磁珠吸附。
单孔磁力架吸附(3 min)
联排磁力架吸附(5 min)
10.倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品。
细胞分离成功
> 用户反馈:“从样本到分选完成,比煮泡面还快!”
四、四大应用场景验证
研究领域 | 实验方案 | 效果 |
肿瘤免疫治疗 | NK细胞扩增后杀伤肝癌细胞 | 杀伤效率提升40%* |
病毒感染研究 | HIV感染模型NK细胞功能监测 | IFN-γ分泌量增加3倍 |
细胞疗法开发 | CAR-NK制备前分选 | 转导效率达78% |
免疫衰老 | 老年人vs年轻人NK细胞活性对比 | 细胞毒性下降50% |
> 注:对比阳性分选法,使用同批PBMC样本
五、用户痛点解决方案
常见问题 | 英诺思对策 |
血小板污染 | 试剂盒含 CD61阻断剂(防非特异结合) |
单核细胞残留 | 优化抗体配方:抗CD14高亲和力 |
低温运输活性下降 | 配送含 细胞保活剂(4℃维持7天活性) |
六、采购支持政策
- 技术支援:流式方案设计 + 分选protocol优化
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