选择单克隆抗体还是多克隆抗体,是几乎所有免疫学实验设计的第一步,没有绝对的“更好",只有“更合适"。
核心结论: 您的选择取决于实验目的。两者是互补的工具,而非相互替代品。
一、 快速对比:一张表看懂核心区别
特性 | 单克隆抗体 | 多克隆抗体 |
来源 | 由单一B细胞克隆产生(杂交瘤技术或重组技术) | 由多种B细胞克隆产生(免疫动物后直接采集血清) |
组成 | 高度均一,只识别同一个抗原表位 | 高度异质,识别多个不同的抗原表位 |
特异性 | 高 | 相对较低,可能发生交叉反应 |
亲和力 | 单一亲和力 | 混合亲和力,是不同亲和力抗体的混合物 |
批次间差异 | 几乎无,可无限稳定生产 | 较大,不同动物、不同免疫批次差异大 |
成本与时间 | 研发耗时、成本高;长期使用成本可能更低 | 制备快速、成本低 |
常见应用 | 治疗、诊断、检测、WB、IHC、FC(需高特异性时) | WB、IHC、IP、ChIP(需高信号灵敏度时) |
二、 如何选择?—— 根据实验类型决定
优先选择【单克隆抗体】的情况:
当您的实验对特异性、一致性和定量要求ji高时,单克隆抗体是shou选。
1. 治疗性药物(如抗体药):必须使用单克隆抗体,确保精确靶向和批次间高度一致。
2. 免疫检测与诊断(如ELISA试剂盒、免疫组化诊断):需要高特异性和可重复性,避免假阳性。
3. 区分蛋白质异构体或磷酸化等翻译后修饰:单克隆抗体可以设计成只识别特定的修饰位点。
4. 流式细胞术:当需要同时使用多种抗体对细胞进行精细分群时,单克隆抗体的高特异性至关重要。
5. 任何需要长期、稳定生产的检测项目。
单克隆抗体的潜在缺点:
“把所有鸡蛋放在一个篮子里":如果它识别的表位在蛋白变性(WB)或固定(IHC)过程中被破坏,抗体就可能wanquan失效。
信号可能不如多克隆抗体强。
优先选择【多克隆抗体】的情况:
当您的实验目标是为了捕获所有形式的靶蛋白、放大信号或进行抗原富集时,多克隆抗体更具优势。
1. 检测低丰度蛋白(Western Blot, WB):由于能识别多个表位,即使某些表位被破坏,其他表位仍可被识别,检测成功率更高,信号更强。
2. 免疫组化/免疫荧光:同样因为多表位识别,能有效放大信号,使染色结果更明亮。
3. 抗原富集实验(如免疫沉淀IP、染色质免疫沉淀ChIP):多个抗体从不同方向“抓住"抗原,富集效率通常更高。
4. 检测未知或变性严重的蛋白。
5. 预算有限或快速出结果的预实验。
多克隆抗体的潜在缺点:
交叉反应性:血清中的其他抗体可能与非目标蛋白结合,导致高背景或假阳性。
供应有限且不稳定:不同批次间需要重新验证。
三、 现代解决方案:混合使用与重组抗体
单克隆抗体混合物:将多个识别不同表位的单克隆抗体混合在一起,兼具了单克隆的特异性和多克隆的高灵敏度/稳健性。这是很多gaoduan诊断试剂盒采用的策略。
重组多克隆抗体:通过基因工程手段,生产一组明确的重组单克隆抗体,然后将其混合。这是未来的发展方向,有望解决传统多克隆抗体的批次差异问题。
简单来说:
求“准"、求“稳" -> 选单克隆。
求“灵"、求“强"、求“全" -> 选多克隆。
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