RNA提取准备工作及注意事项有什么？

2023-11-01 你知道RNA提取准备工作及注意事项都有什么吗？让我们一起来看看吧！一、枪头和EP管等的消毒灭菌1.用去离子水配制0.1%（千分之一）的DEPC（剧毒物），须在通风橱中小心使用，避光密闭4℃保存;DEPC水是用DEPC处理过并经高温高压消毒的纯水。经检测不含RNase、DNase和proteinase。2.将枪头和EP管放入0.1%的DEPC内，保证枪头和EP管内都充满0.1%的DEP。3.避光、静置、过夜（12-24h）4.装枪头和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡，将枪头或者...

如何配置培养基？

2023-10-31 你知道该如何配置培养基吗？让我们一起来看看吧！一、细胞实验全程注意事项1.无菌操作是重中之重，细胞培养对无菌条件比较苛刻，实验人在进行整个细胞实验的无菌意识一定要强，否则一个不小心，发生细菌污染，轻则浪费细胞，重则污染整个培养箱。2.实验人员进入细胞房前应该换上干净的鞋子、白大褂、手套和口罩。3.所有耗材放入工作台前都需用75%酒精进行消毒，双手进入工作台前也需要用75%的酒精进行消毒。4.进行实验前应先对工作台进行紫外灭菌30min以上，并将所有需要用到的耗材放到工作台上一...

如何选择合适的培养基？

2023-10-31 培养细胞的重要环节有很多，其中很重要的一步就是为细胞选择适合的生长环境，为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。细胞培养基是供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物，种类一般包括经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。那么该如何选择合适的培养基呢？让我们一起来看看吧！1.RPMI-1640培养基RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K...

影响WB实验的因素有什么？

2023-10-30 WB实验是分子生物学中最为常见的实验，那么你知道影响WB实验的因素有什么吗？让我们一起来看看吧！一、蛋白样本制备1.蛋白质的样品制备注意以下问题：（1）在合适的条件下，保持蛋白质的最大溶解性和可重复性。（2）选择合适的表面活性剂和还原剂，使其形成各自多肽的溶液。（3）尽量去除核酸，多糖，脂类等分子的干扰，裂解完毕离心之后取中层澄清溶液时避免吸到底层沉淀和上层脂类。（4）整个制作蛋白样本的制备过程必须在低温下进行，避免细胞破碎释放出各种酶类，但是注意不要反复冻融。（5）所抽取样...

DMEM和1640培养基有哪些不同？

2023-10-30 培养基有很多不同的名字是因为根据不同细胞的培养和应用场景，培养基可以分为多种类型，最常见的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。这些培养基有自己的配方特点和适用范围。那么你知道DMEM和1640培养基有哪些不同吗？让我们一起来看看吧！DMEM(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)是一种zui广泛应用的细胞培养基之一，它是由Eagle于1959年开发出来的，后由Dulbecco进行了改良。DMEM主要适用于肝脏、肾脏、肺、心脏等多种类型的哺乳动物...

细胞培养实验常见问题有哪些？

2023-10-27 你知道细胞培养实验常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、细胞污染和感染的处理方法细菌污染：如发现细胞培养物出现混浊或异味，可能存在细菌污染。立即停止细胞培养，对细胞培养器具进行严格的消毒和清洁，更换新的细胞培养物和培养基。真菌污染：真菌污染常常表现为细胞培养物表面的白色或黑色斑点。细胞培养器具应che底清洁，细胞培养物可以添加抗真菌剂来预防和处理。细胞病毒感染：如发现细胞培养物出现明显的细胞溶解和变形，可能存在细胞病毒感染。可使用抗病du药物来处理感染，并且进行核酸检测以...

什么是液体培养基？它的组分有哪些？

2023-10-26 细胞培养，是人工创造与体内生长相似的环境，使细胞生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。培养基是一切体外培养的基础，为细胞的生长和代谢活动提供了各种必需的营养物质。根据培养基的来源和组成成分，它的发展经历了三个阶段，分别是天然培养基阶段、合成培养基阶段以及无血清培养基阶段。那么你知道什么是液体培养基吗？它的组分是什么吗？让我们一起来看看吧！在20世纪50年代，当时体外培养普遍直接采用组织凝块、生物性液体和组织提取液，如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸液等，这就是天然培养基阶段。由...

液体培养基的常见问题有哪些？

2023-10-26 液体培养基是最为常见的培养基类型，它具有可进行通气培养或振荡培养的优势，因为它的流动性便于精确控制培养基的溶液温度、营养浓度和气体含量等；它对细胞生长时的附着能力要求小，细胞可快速扩增；当需要大量细胞培养时也更经济高效。那么你知道液体培养基的常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、液体培养基为什么颜色不一样酚红加量不同，导致颜色差异：DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12&F10。二、培养基放冰箱里颜色变深空气中CO2浓度低，培养基内CO2会逐渐溢出，...