一文了解tNGS

2024-10-31 一、tNGS技术原理tNGS是一种基于超多重PCR扩增（或靶向捕获）与高通量测序两种技术结合的新一代测序技术。它使用大量针对特定基因序列的引物/探针对待测样品中抽提出的核酸进行超多重PCR扩增/探针捕获，获得大量目标核酸片段，再对这些目标核酸片段进行高通量测序，然后对所得序列进行生物信息学分析，从而实现对待测样本中的核酸进行高灵敏以及高分辨率的识别。二、tNGS优点1.针对性强：tNGS只针对特定基因序列进行测序，因此可以大大减少测序数据量，提高检测效率和准确性。2.高灵敏度...

磁珠法提取核酸的优点是什么？

2024-10-30 磁珠法提取核酸的优点一：‌自动化、高通量‌磁珠法核酸提取适合于自动化处理，特别是在高通量实验室中，使用磁珠法核酸提取试剂配合自动核酸提取纯化仪可以快速完成大批量样本的处理，提高工作效率‌。‌磁珠法提取核酸的优点二：‌操作简便‌磁珠法通过简单的震荡混匀和磁力架磁分离步骤即可完成核酸的捕获与纯化，操作流程简化，相对于其他方法更为便捷‌。‌磁珠法提取核酸的优点三：‌核酸回收率高‌磁珠表面功能基团丰富，与核酸的结合能力强，对核酸的回收率较高，尤其是对于微量样本或低浓度核酸样品，磁珠法...

小鼠游离皮质培养试剂盒怎么使用？

2024-10-28 买到了BrainBits小鼠游离皮质培养试剂盒后，该如何使用呢？一、制剂（无菌罩室温）：1.将80µl台普兰蓝（SigmaT8154）加入0.5ml试管中进行下面的步骤4。2.12mlNbActiv1™至室温。3.将2ml分离的初级神经元管置于30℃水浴中加热1分钟。二、细胞分散（无菌罩室温）：1.用硅化巴斯德移液管，将整个试管的内容物转移到无菌15ml离心管中。2.旋转1100rpm(200xG)，1分钟。丢弃上清，留下约50µl含有微球...

新生牛血清常用于哺乳动物细胞的培养基中

2024-10-28 新生牛血清常用于哺乳动物细胞的培养基中，为细胞提供营养物质和生长因子，促进细胞的生长和增殖；可用于生物医学研究中的细胞实验、免疫学实验、病毒学实验等，为实验提供营养物质和生物活性物质；还可用于某些临床诊断试剂的研发和生产，如酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒等。新生牛血清的存储要求：1.储存条件：应储存在-20°C或更低的温度下，避免反复冻融。同时，应避免阳光直射和高温环境。2.开封前检查：在使用前，应仔细检查血清瓶是否有明显的污染或变质迹象，如浑浊、异味等。如果发现异常情...

BrainBits培养基好不好？

2024-10-25 BrainBits培养基是一种无血清培养基，由Neurobasal、B27和Glutamax预混合而成，适用于神经元的生长和培养。‌BrainBits培养基（NbActiv1）由Neurobasal、B27和Glutamax预混合而成，这些成分的组合优化了神经元的生长条件。它特别适用于4天后的神经元存活，并且简化了实验操作，减少了污染的风险‌。一、BrainBits培养基优点‌无血清培养‌：BrainBits培养基是一种无血清培养基，避免了血清批次间差异对实验结果的影响，提高...

全蛋白的提取方法和注意事项

2024-10-25 一、全蛋白的提取方法主要包括以下几种‌。全蛋白的提取方法一：‌细胞准备和清洗‌：首先，准备近乎长满的细胞，例如10cm大皿中的细胞。使用预冷的PBS清洗细胞1-2次，并弃去PBS。全蛋白的提取方法二：‌细胞裂解‌：加入适量的裂解液，如RIPA裂解液（强），并加入PMSF以抑制蛋白酶活性。如果需要提取磷酸化蛋白，还需加入磷酸酶抑制剂。裂解液配好后，将细胞在4℃下裂解15分钟。全蛋白的提取方法三：超声破碎‌：将裂解后的细胞用超声波破碎仪处理1-2分钟，功率保持在20-30%，保持...

怎么提高PCR扩增效率？

2024-10-24 在PCR实验过程中，提高PCR扩增效率是实验成功的关键，下面我们探究一下如何提高PCR扩增效率~1.引物的设计引物的设计是PCR扩增效率的关键。引物长度应在18-30碱基之间，通常为20nt。引物序列应具有dute性，避免在非目的片段中存在。引物的GC含量应在40-60%之间，避免过多的G+C导致非特异条带‌。2.‌优化反应条件‌‌增加循环数‌：通过增加循环次数可以提高扩增效率。‌提纯模板‌：确保模板DNA的纯度，去除杂质和抑制剂。‌使用高质量的Taq酶‌：选择活性高、稳定性...

大小鼠采血具体操作

2024-10-24 1、尾尖采血这是常用且操作简便的方法之一。首先将小鼠固定并暴露其尾巴，通常将其浸泡在40-50℃的温水中几分钟或用酒精棉球擦拭鼠尾，使血管充盈。然后用无菌手术刀快速剪去尾尖1-2mm，血液会自然流出。2、摘眼球采血用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的颈部头皮，小指和无名指固定尾巴。轻压需要摘取的眼部皮肤，使眼球充血突出。用眼科剪剪去小鼠的胡须，防止血从胡须处留下引起溶血。用眼科弯镊夹取眼球并快速摘取，并使血液从眼眶内流入0.5mlEP管中。3、眼眶静脉丛采血：此方法适用于多次重复...