RAW 264.7细胞复苏

2024-10-16 要复苏RAW264.7巨噬细胞，首先需要将含有1mL细胞悬液的冻存管从液氮中取出并快速解冻于37℃水浴中，然后将其转移到1mL新鲜培养基的无菌管中，并ce底混合均匀。接下来，使用1000rpm的离心速度离心5分钟，将上清液倒掉，随后再加入1mL培养基并充分重悬细胞。将悬液加入含有适量培养基的培养皿或瓶中（10ml/10cm皿），并将其放置在培养箱中过夜培养（37℃，5%CO2）。第二天检查细胞的生长状态和密度，以确定是否需要进行传代操作。通过这些步骤，可以有效地复苏RAW26...

PCR-SBT基本原理

2024-10-15 1.PCR扩增PCR-SBT技术首先是对待测DNA进行PCR扩增，以扩增出分型区域。PCR，即聚合酶链反应，是一种在体外快速扩增特定DNA片段的方法。在PCR过程中，需要设计特定的引物，它们能够与待扩增的DNA片段两端互补结合。然后，在DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，按照碱基互补配对的原则，合成新的DNA链。通过多次循环的变性、退火和延伸步骤，待测DNA片段得以大量扩增。在PCR-SBT技术中，为了扩增出HLA基因的多态性区域，通常需要设计多个引物对。这些引物对能够覆...

三一造血人血小板裂解液说明书

2024-10-15 【产品名称】中文名称：三一造血人血小板裂解液英文名称：HumanPlateletLysate(HPL)【货号】RC-002【规格】100mL/瓶、500mL/瓶【性状】本产品为橙黄色略浑浊的液体，久置或反复冻融后，浑浊现象更明显，并有絮状沉淀产生。【运输条件】采用干冰冷冻运输。【贮藏条件与有效期】-20°C保存即可，长期储藏可置于-80°C条件下；建议收到本产品后，将本产品于4°C条件下放置过夜或37°C水浴0.5-1小时进行化冻，然后分装冻存；利用本产品配制的wan全培养基...

感受态细胞制备原理与举例

2024-10-14 一、感受态细胞即受体细胞通过理化方法处理，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态的细胞。二、感受态细胞制备原理将快速生长的大肠杆菌置于经低温0℃预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀（渗透作用），同时，Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞。大肠杆菌DH5α感受态细胞三、大肠杆菌DH5α感受态制备实验步骤实验步骤一从-80℃冰箱中取出保种的DH5α菌株，用灭菌的枪头吸取少量保菌液加...

PCR的提出和发展

2024-10-14 一、起源PCR的发明人，一般认为是穆里斯(K.Mullis)，他也因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。穆里斯在好些写作中，包括1990年在《科学美国人》上的一篇文章，及1998年的自传《心灵luo舞》(DancingNakedintheMindField)，都曾提到PCR这个构想的起源。然而，PCR从构想到实现，真的就是穆里斯一人之功吗?PCR究竟是在什么样的环境下诞生的呢?穆里斯的出身是生物化学家，1972在加州大学伯克利分校取得博士学位，专长有机合成。一早他就表现出桀骜不...

单克隆抗体vs多克隆抗体

2024-10-14 单克隆抗体与多克隆抗体在多个方面存在显著的区别，这些区别包括它们的来源、特性、应用以及生产方式等。尽管单克隆抗体和多克隆抗体在特异性、稳定性和生产方式等方面存在差异，但它们在许多情况下可以互补使用。一、定义与来源单克隆抗体：是指通过B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞系所产生的抗体。这种抗体是由单一的B细胞克隆产生的，因此具有高度均一性和特异性。它们通常是通过杂交瘤技术从动物细胞中获得。多克隆抗体：则是从动物血清中获得的抗体，属于多种B细胞产生的混合物。这些抗体可以受到...

在基因操作中如何选用载体？

2024-10-12 ‌在基因操作中选用载体的核心原则‌是确保载体能够满足基因工程的基本要求，包括能够在宿主细胞内稳定存在并复制、具有多个限制酶切点以便于目的基因的插入、带有标记基因以便于筛选等‌。图为质粒构建基本流程在基因操作中选用载体的核心原则一‌能够自主复制‌：确保载体在宿主细胞内能够自我复制，从而增加目的基因的数量‌。在基因操作中选用载体的核心原则二‌遗传标记物‌：载体应具有两个以上的遗传标记物，便于重组体的筛选和鉴定‌。在基因操作中选用载体的核心原则三‌克隆位点‌：载体应具有一个或多个特...

Transwell细胞迁移实验注意事项

2024-10-12 Transwell细胞迁移实验，也称为Transwell迁移或侵袭测定实验，是一种用于细胞生物学和分子生物学的实验室技术，用于研究细胞通过多孔膜的运动。前面已经讲过实验步骤，那实验过程中需要注意些什么呢？注意事项一基质胶在室温下容易凝固，铺胶过程全程需要在冰上操作。注意事项二基质胶浓度也是影响细胞迁移和侵袭的因素之一，所以基质胶的浓度和稀释比例需根据供应商提供的信息和实验具体情况调整，必要时可设置预实验摸索最佳浓度和稀释比例。一般常用浓度为1mg/mL。注意事项三铺胶时，尽量...