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小蝴蝶昆虫培养基的使用要小心加谨慎

 更新时间:2023-02-03    点击量:581
  小蝴蝶昆虫培养基的关键是培养基配方的开发,已有多种培养基用于支持昆虫细胞系的生长。昆虫细胞培养所用培养基一般均补加FBS,血清提供了细胞生长过程中所需的营养物质和微量元素,使细胞能健康生长和传代。但是FBS的使用也存在着缺点:价格高;每批血清的质量不同,影响细胞的生长和病毒复制;血清中的蛋白影响从培养的上清液中分离和提取重组蛋白,使蛋白的纯化更加困难;血清易被支原体污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆虫培养基变得很复杂。因此,无论工业上或学术上,开发无血清培养基都是必然的趋势。
 
  由于在无血清培养基中含有从血清或动物脏器中纯化的蛋白成分,如胰岛素、转铁蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分离纯化的难度和成本。细胞在无血清低蛋白或无蛋白培养基环境中对剪切应力更为敏感,故需适当提高保护剂的浓度。无血清培养基的应用有时会降低重组蛋白的产量,在无血清培养基内,较高的细胞生长密度与相对较低水平的重组蛋白产量这一事实表明,促进细胞分裂的因子与促进重组蛋白生产的杆状病毒感染晚期起作用的因子是不尽相同的。
 
  小蝴蝶昆虫培养基旨在用于大规模扩增草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系,也常用于通过杆状病毒表达系统(BEVS)进行蛋白表达。 IPL-41培养基是对原始IPL配方的改良,用于大规模扩增草地贪夜蛾衍生细胞系。Weiss向基础培养基中加入了胎牛血清和TPB培养基(Tryptose Phosphate Broth),成功地实现了IPL-21 AE (III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。
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