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食管癌3D类器官培养基

简要描述:食管癌类器官培养基(ESophaqus Carcinoma Organoid Medium)是一种为促进食管鳞癌类器官体外形成和扩增而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的*配方可以提供一个较适合的食管鳞癌类器官扩增所需营养环境,选择性地促进体外人食管鳞癌类器官的生长。

  • 产品型号:PRS-ECM-3D
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2022-07-08
  • 访  问  量:444
详情介绍

产品说明食管癌类器官培养基(ESophaqus Carcinoma Organoid Medium)是一种为促进食管鳞癌类器官体外形成和扩增而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的*配方可以提供一个较适合的食管鳞癌类器官扩增所需营养环境,选择性地促进体外人食管鳞癌类器官的生长。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明:
◉  实验前准备
1)消化好的食管癌原代细胞悬液。
2)15mL无菌离心管、1.5mL离心管、24孔细胞培养板、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30 min。
3)提前30min从4℃冰箱取出食管癌类器官培养基平衡至室温,提前从-20℃冰箱取出所需体积的基质胶冰上融化。

◉  食管癌类器官培养
1)将消化好的食管癌细胞悬液计数,按照1-2万细胞每孔计算所需的细胞数,根据计算好的体积吸取细胞悬液加入预冷的1.5mL离心管中,补齐预冷的DMEM/F12至所需体积。
2)将预冷后的细胞悬液加入等体积的基质胶中轻轻混匀(全程冰上操作),然后将细胞与基质胶的混合液按照40μL/孔接种于24孔板。
3)将接种好的培养板放入培养箱至少30min,待基质胶完全凝固,然后沿24孔壁每孔缓慢加入500μL预先恢复至室温的类器官培养基,3天后镜下观察类器官形成情况,粒径大于50μm即认为类器官已经形成。
4)每5天更换一次培养基进行培养,持续观察类器官大小,镜下观察大部分类器官大小均大于50μm且大小不再增大即可收集类器官进行后续实验。

◉  食管癌类器官收集
1)吸去培养基,每孔加入200μL基质胶解离试剂,轻轻吹打混匀,收集至15mL离心管中。

2)37℃解离30min(具体解离时间根据实际情况决定,以无明显大块胶状物为准),解离之后1500rpm离心3min,轻轻吸去上清,待用。
◉  食管癌类器官传代
1)解离之后的细胞加入适量的消化酶,37℃,200rpm消化(具体时间根据类器官大小和数量决定,以无肉眼可见颗粒为准)。

2)消化完全后1500rpm离心3min,轻轻吸去上清,使用终止培养基重悬后1500rpm离心3min,加入预冷的DMEM/F12培养基进行重悬,计数,按照培养步骤操作继续培养。
注意事项:
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
3.为保持本产品的最佳使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。4.请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。
5.样本需为食管鳞癌术中样本,且肿瘤细胞比例越高(至少>50%),培养成功率越高,不推荐用于少量样本(如内镜或者循环肿瘤细胞)的培养。
6.本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。


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