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乳腺癌3D类器官培养基

简要描述:乳腺癌类器官培养基(Breast Carcinoma Organoid Medium)是一款促进乳腺癌类器官体外形成和扩增的培养基。该产品为无菌的液体混合系统,含有维持目的细胞生长所必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物和生长因子等。该培养基的*配方可以提供一个合适的细胞所需营养环境,选择性地促进人乳腺癌类器官的体外生长和扩增。

  • 产品型号:PRS-BCM-3D
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2022-07-08
  • 访  问  量:524
详情介绍

产品说明乳腺癌类器官培养基(Breast Carcinoma Organoid Medium)是一款促进乳腺癌类器官体外形成和扩增的培养基。该产品为无菌的液体混合系统,含有维持目的细胞生长所必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物和生长因子等。该培养基的*配方可以提供一个合适的细胞所需营养环境,选择性地促进人乳腺癌类器官的体外生长和扩增。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明:
◉  实验前准备
1)提前将24孔细胞培养板置于37℃的培养箱中预热过夜。
2)将15mL无菌离心管、1.5mLEP管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30 min。
3)提前30 min从4 ℃冰箱取出乳腺癌类器官培养基平衡至室温。(4)提前从-20℃冰箱取出所需体积的细胞外基质胶冰上融化。(5)配置含1%BSA的DMEM培养基冰上预冷备用。
◉  乳腺癌类器官培养
1)将取自乳腺癌患者的样本进行分离和消化,消化后的细胞悬液进行计数。
2)按每孔1~2×10*个细胞密度计算所需细胞数,根据计算好的体积吸取细胞悬液加入预冷的1.5mL离心管中,离心,弃上清,将细胞沉淀置于冰上。
3)按1∶2体积比,将一份体积的含1%BSA的DMEM加入2份体积的的细胞外基质胶(Corning#356231)中,轻轻混匀(全程冰上操作),然后在冰上将配好的基质胶混合液与细胞沉淀充分混匀。
4)将细胞沉淀与基质胶的混合液按照35μL/孔滴在已提前预热好的24孔板中央,使之形成圆顶状胶滴。缓慢将细胞培养板移至培养箱至少30分钟。
5)待基质胶完全凝固,沿24孔壁缓慢加入1mL/孔预先恢复至室温的本类器官培养基,并将培养板置于37℃,5%CO2条件下静置培养。
6)镜下观察类器官形成情况,每3~4天更换一次培养基。
◉  乳腺癌类器官收集
1)弃去培养基,用基质胶解离试剂润洗枪头后,每孔加入1mL该试剂,静置1min。

2)用基质胶解离试剂润洗枪头后,吸取孔内液体,轻轻吹打圆顶状胶滴表面,将胶滴吹散,并将吹散后的含类器官的混合液收集至15 mL离心管中。
3)重复一次上述操作,将两次洗脱下来的类器官合并收集于同一15mL离心管中。
4)37℃,75rpm水平摇床上解离10min(具体解离时间根据实际情况决定,以无明显大块胶状物为准)。
5)10分钟后在4℃下,300g,离心5min,小心吸弃上清,沉淀待用。
◉  乳腺癌类器官传代
1)收集好的细胞沉淀(以无肉眼可见基质胶状沉淀为准)加入预冷的含1%BSA的DMEM培养基重悬,在4℃下,300g,离心5min。

2)小心吸弃上清,沉淀用含1%BSA的DMEM培养基重悬计数。
3)按照培养步骤操作,以大约1000个类器官/孔密度重新接种类器官,继续扩大培养。
注意事项:
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
3.本产品中不含血清,含有抗生素,如无特别需要,不用额外添加血清和其他抗生素,可直接使用。
4.为保持本产品的最佳使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.请于保质期内使用本产品,超出保质期后,将无法达到理想的使用效果。
6.乳腺组织样本建议为肿瘤术中样本,且肿瘤细胞比例越高(至少>50%),培养成功率越高,不推荐用于少量样本(如穿刺或循环肿瘤细胞)的培养。
7.本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。



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