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肠癌3D类器官培养基

简要描述:肠癌类器官培养基(Intestine Carcinoma Organoid Medium)是一种为促进人源肠癌类器官体外形成和扩增而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的*配方可以提供一个最佳人源肠癌类器官体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌类器官的生长。

  • 产品型号:PRS-ICM-3D
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2022-07-08
  • 访  问  量:507
详情介绍

产品说明肠癌类器官培养基(Intestine Carcinoma Organoid Medium)是一种为促进人源肠癌类器官体外形成和扩增而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的*配方可以提供一个最佳人源肠癌类器官体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌类器官的生长。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明:
◉  实验前准备
1)15mL无菌离心管、1.5mL离心管、24孔细胞培养板、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30 min。
2)提前30min从4℃冰箱取出肠癌类器官培养基平衡至室温,提前1h从-20℃冰箱取出所需体积的基质胶冰上融化。
◉  癌类器官培养
1)将获取的肠癌原代细胞悬液计数,根据计算好的体积吸取细胞悬液加入预冷的1.5mL离心管中,补齐预冷的肠癌类器官培养基至所需体积。
2)将预冷后的细胞悬液加入等体积的基质胶中轻轻混匀(全程冰上操作),避免气泡,使肠癌原代细胞终浓度为5× 105个细胞/量升。然后将细胞与基质胶的混合液按照50uL/孔呈半球形点胶干24孔板。
3)将培养板放入5%CO2 37℃培养箱终至少30min,待基质胶完全凝固。沿孔壁每孔缓慢加入500μL预先恢复至室温的类器官培养基,放置5%CO2、37℃培养箱培养。
4) 3天后镜下观察类器官形成情况粒径大于30~50μm即认为类器官已经形成。
5)每5天更换一次培养基进行培养,持续观察类器官大小,镜下观察大部分类器官大小均大于30~50μm且大小不再增大即可收集类器官进行后续实验。
◉  癌类器官收集

(1)弃培养基,每孔加入200μL基质胶解离试剂,室温放置1min,轻轻吹打混匀,收集至15mL离心管中。
(2)50rpm恒温震荡解离10-20min,解离之后1500rpm离心3min,轻吸去上清,待用。

◉  癌类器官传代
1)收集的类器官,加入适量的消化酶,37℃,200rpm消化(具体时间根据类器官大小和数量决定,以肉眼可见颗粒明显减小一半为准,可中间取消化的类器官显微镜观察,类器官消化至3~10个细胞集合体最佳)。

2)消化完全后1500rpm离心3min,弃上清,使用清洗液重悬后1500rpm离心3min;加入预冷的肠癌类器官培养基进行重悬,计数,按照培养步骤操作继续培养。
注意事项:
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.样本需为肿瘤组织,且肿瘤细胞比例越高(>50%),类器官培养成功率越高。3.使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
4.为保持本产品的最佳使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.类器官培养过程要轻柔,避免基质胶凝固后散胶。
6.请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。
7.本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。


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