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首页 > 产品中心 > 产品  >  试剂  >  Prime-AQ100-100MLHEK293细胞转染试剂

HEK293细胞转染试剂

简要描述:HEK293细胞转染试剂,PEI Prime是以一种阳离子高分子聚合物-聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体的基因转染试剂。

  • 产品型号:Prime-AQ100-100ML
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-03-15
  • 访  问  量:415
详情介绍

产品名称:HEK293细胞转染试剂

产品简介:
PEI线性转染试剂(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是以一种阳离子高分子聚合物-聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体的基因转染试剂。PEI是在pH中性溶液中具有*正电荷密度的合成聚合物。带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。PEI Prime是一种高性能转染试剂,利用PEI的特性旨在实现高产量,可重复性和可扩展的瞬时基因表达。


应用范围:

PEI转染试剂能够高效率转染多种细胞系,包括贴壁细胞和悬浮细胞。此外,PEI是用于HEK293和CHO悬浮细胞转染的试剂。PEI转染试剂是生产任何具有成本效益的生物制剂的合适选择,包括重组蛋白,抗体和病毒。



PEI线性转染试剂产品优势:

1. 低毒,高效

2. 操作简单,高性价比

3. 可提供可靠、具有可重复性的转染结果

4. 适用于快速、高通量转染流程


转染步骤:

-以HEK293贴壁细胞为例,步骤如下:

1. 细胞接种:细胞密度2-6 x106 cells/mL。

2. 质粒的准备:在5%最终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释1.0 ug pDNA。

3. PEI的准备:在5%最终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释3.0 ug PEI Prime,混匀。

4. 通过快速,短暂涡旋或颠倒数次试管,将pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

5. 使pDNA和PEI的混合物在室温下静置10分钟。

6. 一边旋转板,一边将pDNA和PEI混合物逐渐滴加到细胞中。

7. 于37℃ CO2培养箱中培养。




转染的优化:

为达到高转染效率和低细胞毒性的理想结果,可以进行如下优化:

参数

范围

PEI浓度

3.50-6.50mg/(L final culture)

DNA浓度

0.75-1.5mg/(L final culture)

PEI/DNA混匀时间

5.0-15.0minutes


与市场同类品牌的PEI转染效率的对比:

使用PEI Prime(PEI:DNA浓度比3:1)或某国外品牌PEI,用CMV-SEAP质粒转染20ml 含HEK293悬浮细胞的培养物。 转染后5天,使用磷酸酶报告染料和UV / Vis检测SEAP表达水平。数据表示占某国外品牌PEI的SEAP表达水平的百分比。结果显示我们的PEI Prime 的转染效率比国外同类厂家高出40%。


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