提高细胞转染效率，这些关键点你知道吗？

2023-08-23 细胞转染是现代生物学研究中常用的实验技术之一，它使研究者能够引入外源DNA、RNA或蛋白质等分子到目标细胞中，以研究细胞的功能和相互作用。然而，进行细胞转染实验时需要注意一些关键细节，以确保实验的准确性、可靠性和可重复性。提高细胞转染效率，这些关键点你知道吗？一、合适的细胞类型和培养条件不同的细胞类型对转染方法和试剂的敏感性有所差异，因此在进行转染实验之前，要仔细选择合适的细胞类型，并确保其在适当的培养条件下生长良好。了解细胞的特性和要求，包括细胞密度、培养基成分、培养时间等...

什么是荧光原位杂交？

2023-08-23 荧光原位杂交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核...

蛋白质定量有哪些方法？

2023-08-22 蛋白定量是蛋白分离和分析前必须的一个重要步骤，蛋白色谱分离、蛋白质电泳分析、蛋白质免疫分离和分析、细胞裂解释放的总蛋白定量、蛋白分子的标记、蛋白结构分析等，都需要可靠的定量分析作为基础。蛋白定量分析应用的领域包括生物科学，食品检验，临床检验等等。蛋白质定量有哪些方法？让我们一起来看看吧！一、比色法蛋白定量常使用的方法是比色法，通常用于总蛋白的定量分析。根据蛋白和比色试剂的结合，可以将比色法分为：蛋白-染料结合法和蛋白-铜螯合化学试剂法。前者对应的典型蛋白定量比色法是考马斯亮蓝...

WB实验中条带不跑歪的秘诀

2023-08-21 在做Westernblot实验时，你一定会遇到各式各样的条带，最常见的就是条带跑歪了，如凹型条带、凸型条带、斜条带、条带拖尾等。如何更好的做好WB实验，让我们一起来看看WB实验中条带不跑歪的秘诀吧！一、凹凸条带的原因和解决办法可能原因：可能是由于胶未配好（凝胶未能wan全聚合，胶中有颗粒或气泡，凝胶未冷却好，），也可能是电压过高。解决方法：正确添加质量合格且未过期的AP及TEMED；过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡；凝胶冷却好后再上样；降低电压。二、条带出现黑点或黑斑的...

Q-pcr 和 RT-pcr 有啥区别？

2023-08-21 Q-PCR和RT-PCR都是分子生物学中常用的技术，用于检测和定量特定的核酸序列。Q-pcr和RT-pcr有啥区别？它们的原理和应用类型相同吗？今天让我们一起来了解一下吧！一、Q-pcr和RT-pcr原理上的不同Q-PCR也是基于PCR的技术，但它引入了荧光探针或荧光染料来实时监测PCR反应的进程。荧光信号的强度与目标序列的数量成正比，因此可以定量地测量起始样品中的目标核酸数量。RT-PCR结合了逆转录（ReverseTranscription）和聚合酶链式反应（PCR）的过...

PolyPlus转染试剂jetPRIME®产品问题汇总

2023-08-18 问题一：化合物Q：INTERFERin®是什么类型的化合物？A：INTERFERin®是新一代的非脂质体阳离子两性分子转染试剂，专为培养的哺乳动物细胞的siRNA转染而开发。使用INTERFERin®，加入1nM的siRNA就能达到90%以上的沉默效率。问题二：细胞Q:INTERFERin®已成功转染的细胞系有哪些？A:INTERFERin®已被成功用于多种贴壁细胞和非贴壁细胞系，例如HeLa，HEK-293,A549MDA-MB-23...

CRISPR Cas9酶是一种基因编辑工具

2023-08-18 CRISPRCas9酶是一种基因编辑工具，用于修改生物体的基因组。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一种存在于细菌和古细菌中的一类DNA序列，而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR系统中的一种酶。从细菌中发现的一种天然的免疫系统，用于抵御病毒入侵。它通过记录病毒的DNA片段，并将其整合到自身的基因组中，形成CRISPR序列。当同一病毒再次入侵时，CR...

原代细胞如何获取？

2023-08-17 原代细胞(primarycell)：是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞的获取难度大、需要考虑的问题多，原代细胞如何获取？原代细胞的获取，就是从活体上将组织分解成单个细胞再进行培养的过程，且整个过程要求无菌操作。具体要考虑的问题有：组织分解的方式，培养的时间，换液时间，细胞状态判断和冻存。一、...