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022-66387942一、产品简介
293细胞专用转染试剂盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit,适用于HEK293细胞及其他HEK293细胞的高密度悬浮培养、DNA瞬时转染及蛋白表达。
PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit适用范围:HEK293细胞悬浮培养、其他HEK293细胞的高密度悬浮培养、DNA瞬时转染及蛋白表达。
该试剂盒包括下列试剂:
(1)PolyTool™ 293 Transfection Reagent (悬浮293细胞转染试剂);
(2)PolyTool™ 293 Medium(化学限定293 细胞无血清细胞培养液);
(3)PolyTool™ 293 B(化学成分限定的、高浓度营养成分的补料 1);
(4)PolyTool™ 293 C(化学成分限定的、高浓度营养成分的补料 2)。
PolyTool™ 293 Transfection Reagent 配合PolyTool™ 293 Medium、PolyTool™ 293 B及PolyTool™ 293 C使用,可大幅度提高重组蛋白的表达产量。
二、操作流程
1.细胞接种(以25mL体系为例):
根据细胞状态,选择合适的接种密度,建议接种密度为 1×106 cells/mL,待第二天细胞密度达到2×106 cells/mL左右,活性大于95%时进行转染。
2.瞬时转染:
建议质粒(μg)与试剂(μL)参考配比区间为1:3~1:5之间。具体步骤如图1所示(以1:4为例):
(1)使用本样品前涡旋混匀5秒,使用1.25 mLPolyTool™ 293 Medium稀释100 μL的转染试剂,并吹打均匀;
(2)使用1.25 mL PolyTool™ 293 Medium稀释25 μg质粒,并吹打混匀;
(3)将(1)和(2)所述溶液混合均匀;
(4)将(3)所述混合溶液室温静置孵育10~15 min;
(5)将(4)中的复合物溶液加入25 mL的细胞培养体系中,放回摇床中,在37 ℃、震荡速度120 rpm下继续培养。
3.产物表达与检测:
(1)转染24小时、72小时、120小时、168小时后加入3%(75 mL/100mL)PolyTool™293 B,0.3%(75 μL/25 mL)PolyTool™ 293 C。
(2)转染后第5~7天测定产物表达量。多数蛋白的合成在转染后第5天左右可达到最高值,客户可根据细胞状态及表达量选择适宜的收获时间。
图1 细胞转染示意图
293细胞专用转染试剂盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向,专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售,经营的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务,努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。
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