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一、产品简介
二、产品目录表
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，大包装） | SN4103L | up to 1X10^9细胞 |
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，中包装） | SN4103M | up to 5X10^8细胞 |
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，小包装） | SN4103S | up to 1X10^8细胞 |
三、试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail | 4°C保存，避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 识别非CD8 T细胞抗体混合液，标记非目的细胞 |
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存，避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠结合非CD8 T细胞，通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件： 4°C运输
设备和试剂要求
· 缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
· 耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管
· 仪器：离心机，磁力架
温馨提示
· 脾脏样本无需裂红处理
· 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作，能够提高细胞得率
· 确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感
· 确保每一步无菌操作，谨防污染
四、操作步骤
步骤 | 说明 | 剂量和时间 |
1 | 准备脾脏单细胞悬液至指定浓度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail至样品中 | 100 μL/mL |
3 | 抗体和细胞孵育 | 常温孵育10 min |
4 | 震荡混匀 Streptavidin Nanobeads | 混匀30 s |
5 | 加Streptavidin Nanobeads至样品中 | 100 μL/mL |
6 | 轻柔混匀磁珠和细胞，孵育 | 常温孵育5 min |
7 | 加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀 | 总体积加入至2.5 mL （5 mL流式管） 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
8 | 样品置于磁力架上，使磁珠吸附 | 单孔磁力架吸附（3 min） 联排磁力架吸附（5 min） |
9 | 倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品 | 细胞分离成功 |
五、数据展示
如图：小鼠脾脏CD3 T 细胞的分离。（A）分离C57BL/6背景小鼠的脾脏，磨碎后采用70 μm无菌尼龙滤网过滤后，进行CD8和CD3染色，CD3+CD8+比例约11.1%。（B）采用（#SN4103）分离CD8 T细胞，分选后的CD3+CD8+细胞纯度高达94%。
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