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022-66387942人单核细胞分选试剂盒 #SN3401
本试剂盒采用阴选的方式,通过无柱磁极分离人PBMC中的单核细胞( CD11b+CD14+)。分离过程中抗体和磁珠不会接触单核细胞,能够最 大限度保持单核细胞最原始的状态。
. 操作简便
. 纯度最高可达92%
. 约30分钟完成分离
试剂盒通过生wu素偶联的抗体标记非单核细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一 个新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
EasyIso TM Human FcR Blocker | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 封闭FcR受体,降低抗体非特异性结合 |
EasyIso TM Human Monocyte Isolation Cocktail | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 识别非单核细胞抗体混合液,标记非目的细胞 |
EasyIso TM Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠结合非单核细胞,通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 运输条件: 4°C运输
设备和试剂要求
. 缓冲液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材:70 μm无菌尼龙滤网;无菌离心管
. 仪器:离心机 ,磁力架
温馨提示
. 请采用预冷的FACS buffer进行细胞分选
. 推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离PBMC,不建议采用红细胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作 ,能够提高细胞得率
. 确保FACS Buffer渗透压稳定,免疫细胞较为敏感
. 确保每一步无菌操作,谨防污染
操作步骤
步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
1 | 准备PBMC单细胞悬液至指定浓度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso TM Human FcR Blocker至样品中 | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso TM Human Mococyte Isolation Cocktail至样品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗体和细胞孵育 | 4℃孵育15 min |
5 | 震荡混匀 Streptavidin Nanobeads | 混匀30 s |
6 | 加Streptavidin Nanobeads至样品中 | 100 μL/mL |
7 | 轻柔混匀磁珠和细胞,孵育 | 4℃孵育15 min |
8 | 加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀 | 总体积加入至2.5 mL ( 5 mL流式管) 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
9 | 样品置于磁力架上 ,使磁珠吸附 | 单孔磁力架吸附( 3 min) 联排磁力架吸附( 5 min) |
10 | 倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品 | 细胞分离成功 |
如图:采用Immuno-X系列产品(#SN3401)分离PBMC中的单核细胞。(A)分选前,单核细胞比例约占PBMC细胞的16.9% ,采用 (#SN3401)分离健康人PBMC中单核细胞,采用CD11b和CD14的流式抗体进行染色 ,分选后的单核细胞纯度高达90.7%。
人单核细胞分选试剂盒——英诺思生物代理——天津益元利康生物科技有限公司
成立于2018年,坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、 细胞生物学等多个方向,专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售,经营的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务,努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。
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