百奥益康蛾肠道组织解离试剂盒适用于蛾肠道组织细胞悬液的分离制备,本产品利用酶温和、快速有效地破坏细胞外基质,释放细胞,从而生成单细胞悬浮液。
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一、产品简介
百奥益康蛾肠道组织解离试剂盒,本产品适用于蛾肠道组织细胞悬液的分离制备,本产品利用酶温和、快速有效地破坏细胞外 基质,释放细胞,从而生成单细胞悬浮液。制备的单细胞悬液可用于细胞分选、细胞培养或 其他细胞相关检测。
保存条件-20℃保存,有效期两年。
二、注意事项
1. 离心机务必使用水平离心机,并设置合适的参数,避免因操作不当影响实验结果。
2. 本产品为无菌产品,请穿实验服并佩戴一次性手套,注意无菌操作,避免微生物污染。
3. 使用前需确保试剂wanquan融化并混匀。 4. 昆虫细胞较脆弱,颠倒及吹打操作应轻柔,吸取及吹打细胞尽量使用扩口枪头。 自备材料 1. 仪器:水浴锅(定时手动摇晃混匀)或杂交炉(转速20~30转/分钟)、水平离心机。 2. 试剂:D-Hanks 缓冲液(不含钙镁)、FBS。 3. 耗材:低吸附枪头、5mL和15mL离心管、40μm细胞筛。
4. 消化:具体消化时间根据物种与组织量不同灵活调整。
三、使用方法
准备工作:水浴锅或杂交炉设置到28℃、配制含4%FBS的D-Hanks。 切取10~15只新鲜蛾肠道组织。
取一个5mL离心管,加入3mL蛾肠道组织解离液。
将组织样本用4%FBS的D-Hanks清洗干净,在少量(约40µL)蛾肠道组织解离液中充 分剪碎,并转移到第1步准备好的溶液中,颠倒混匀。
放在28℃水浴锅或杂交炉中消化25~35min。消化过程中,使用水浴锅每隔3~5min 手动吹打摇晃混匀,使用杂交炉转速20~30转/分钟左右。
每隔5min质检一次细胞悬液,根据细胞总量及活性等确定消化终止时间。
消化完成后,用40μm细胞筛过滤细胞悬液,收集滤液于15mL离心管中。
使用6mL4%FBS的D-Hanks涮洗消化管管壁,涮洗液经过同一个40μm细胞筛进行过 滤,收集滤液于第5步的15mL离心管中,共9mL。
将收集液于4℃,300×g离心5min,弃上清。
用50µL~1mL4%FBS的D-Hanks重悬沉淀,根据所需的细胞浓度调整重悬液的体积。
(可选择步骤)可再加入4mL4%FBS的D-Hanks并混匀,4℃,300×g离心5min,弃 上清,加入适当体积4%FBS的D-Hanks重悬沉淀(细胞数会有损失)。
百奥益康蛾肠道组织解离试剂盒——天津益元利康生物科技有限公司
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